討論：我公司對(duì)三種小肽原料的檢測(cè)、結(jié)果與疑問（氮溶指數(shù)）

yinghuier

前段時(shí)間有好幾家西南地區(qū)做小肽原料的廠家到我們公司推銷各自的小肽產(chǎn)品，從外觀、細(xì)度、氣味等反面看還是存在一定差別的。但他們大都宣傳說自己的產(chǎn)品是發(fā)酵生產(chǎn)的小肽，都說自己產(chǎn)品的酶解程度很高，小肽含量如何如何。并給我們提供了樣品和檢測(cè)方法。由于我們廠一直十分關(guān)注新型原料的開發(fā)和使用，對(duì)原料質(zhì)量的掌控和非常認(rèn)真。因此針對(duì)這些廠家的樣品都按照他們的方法進(jìn)行了檢測(cè)。
氮溶指數(shù)（TCA-NSI）檢測(cè)方法在下面，檢測(cè)的基本原理是：
第一步，先用三氯乙酸和離心的方法沉淀出不可溶蛋白，然后再用凱氏定氮法測(cè)定溶液中可溶蛋白（即可溶性小肽）占總樣品的百分含量C1。
第二步，用凱氏定氮測(cè)定樣品中的總蛋白C2。
第三步，用  可溶性蛋白的百分含量C1/總蛋白的百分含量C2 ，得到氮溶指數(shù)（TCA-NSI）
但。。。。。。。。。。結(jié)果卻令我十分費(fèi)解，我們一共對(duì)3家產(chǎn)品進(jìn)行了檢測(cè)，得到的C1（可溶性蛋白）的值卻驚人相似:31.25%、31.26%、31.26%。而所測(cè)得的粗蛋白值C2在46.5%~47.0%不等。其中一個(gè)的氮溶指數(shù)（TCA-NSI）=31.25%/46.72%=66.89%。其他的兩個(gè)樣品的氮溶指數(shù)（TCA-NSI）結(jié)果也和這個(gè)結(jié)果相差不多。
我比較納悶，雖然我們公司的品管部門的檢測(cè)十分認(rèn)真負(fù)責(zé)，但畢竟是三個(gè)不同廠家生產(chǎn)的產(chǎn)品，而且是發(fā)酵產(chǎn)品，其發(fā)酵分解的程度也不會(huì)標(biāo)準(zhǔn)統(tǒng)一到這樣一個(gè)程度吧：可溶性蛋白31.25%、31.26%、31.26%。要真是這樣我還得真為我們國家飼料行業(yè)而高興呢。
單從粗蛋白含量上來看，使用的應(yīng)該是高蛋白脫皮豆粕，具體的生產(chǎn)過程和工藝我們沒有見到，也不得而知。但是單從結(jié)果上來看，確實(shí)讓人很奇怪。雖然之前我也見過這個(gè)檢測(cè)方法，但我個(gè)人開始懷疑這個(gè)檢測(cè)方法和計(jì)算公式存在一定問題，懷疑我們所得的這個(gè)C1值31.26%是一個(gè)常數(shù)，也就是試劑反應(yīng)所得的結(jié)果，或者是按照該方法測(cè)任何蛋白原料，至少是豆類產(chǎn)品都會(huì)得到這樣的結(jié)果。所以我們用該方法對(duì)豆粕進(jìn)行了化驗(yàn)，可結(jié)果卻令人失望，可溶性蛋白的含量只有20%左右遠(yuǎn)低于31.26%，根本不是我們?cè)仍O(shè)想的那樣。
于是這矛盾便產(chǎn)生了。我搞不懂了，究竟是什么原因，使得三家沒有任何關(guān)系的原料生產(chǎn)企業(yè)，為我們提供了三種檢測(cè)結(jié)果驚人一致的樣品。俗話說：十個(gè)手指頭伸出來還不一樣長呢。所以在這里要請(qǐng)教各位高人，幫忙分析一下，究竟是為什么會(huì)出現(xiàn)這樣的情況。
附錄：氮溶指數(shù)（TCA-NSI）檢測(cè)方法
發(fā)酵大豆蛋白中小肽的測(cè)定
1、原理：
利用三氯醋酸作蛋白質(zhì)沉淀劑，將發(fā)酵大豆蛋白中的蛋白質(zhì)和肽鏈較長的肽沉淀，并將其中的短鏈小肽用酸溶解出來，經(jīng)過濾、離心、消化、蒸餾，測(cè)定其蛋白質(zhì)含量，并以其占樣品粗蛋白質(zhì)的百分?jǐn)?shù)來表示含量。本方法是參照中華人民共和國輕工行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)大豆肽粉標(biāo)準(zhǔn)(QB/ T 2653 -2004)基礎(chǔ)上修訂而來。
2、試劑及儀器：
1）100ml燒杯；
2）10ml，50ml移液管；
3）干過濾裝置；
4）半微量法或全量法粗蛋白質(zhì)測(cè)定的試劑和裝置；
5）15％三氯醋酸溶液；
6）4000 轉(zhuǎn)/ 分鐘的離心機(jī)。
3、方法：
準(zhǔn)確稱取樣品6克于100 ml燒杯中,準(zhǔn)確加入15 %三氯乙酸溶液50 毫升，混合均勻，靜置5 分鐘，以中速定性濾紙干過濾，棄去少許初始濾液，將濾液轉(zhuǎn)移至離心管，在4000 轉(zhuǎn)/ 分鐘下離心10 分鐘，準(zhǔn)確移取其上清液10ml于消化管中，按半微量法（消化后定容至100ml，準(zhǔn)確移取其中10ml進(jìn)行蒸餾）或全量法粗蛋白質(zhì)測(cè)定方法測(cè)定其粗蛋白質(zhì)含量。同時(shí)做空白試驗(yàn)、測(cè)定樣品的粗蛋白質(zhì)的含量。
4、結(jié)果與計(jì)算：
小 肽%（半微量法）=（V1－V0）×C×6.25×0.014×10×5÷m×100%÷cp×100%
小 肽%（全量法）=（V1－V0）×C×6.25×0.014×5÷m×100%÷cp×100%
            式中：
V1--餾出液消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液的體積，ml；
V0--空白試驗(yàn)消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液的體積，ml；
C--鹽酸的摩爾濃度，mol/l；
6．25×0．014--蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)換系數(shù)；
m--稱取樣品質(zhì)量，ｇ；
cp—樣品的粗蛋白質(zhì)含量，%。
重復(fù)性:   A）、每個(gè)試樣的兩個(gè)平行樣間允許相對(duì)偏差為其算術(shù)平均值的10%，以其算術(shù)平均值上報(bào)結(jié)果；              
C）、所得的結(jié)果是指小肽占粗蛋白質(zhì)的百分含量。
因其中含有無機(jī)氮，測(cè)得結(jié)果應(yīng)減去無機(jī)氮，見非蛋白氮的測(cè)定。

yinghuier

相當(dāng)感動(dòng)！有人來看我的東西。就是因?yàn)楦悴幻靼撞乓黄鸾涣?，大家一起研究研究，時(shí)間長了。不明白的也就變成明白的了。

豬爪爬天下

忒有技術(shù)含量了

樓主提出的值得注意了!

月亮花

原帖由 yinghuier 于 2007-10-4 09:48 發(fā)表
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前段時(shí)間有好幾家西南地區(qū)做小肽原料的廠家到我們公司推銷各自的小肽產(chǎn)品，從外觀、細(xì)度、氣味等反面看還是存在一定差別的。但他們大都 ...

1 粗蛋白在46%左右不一定就是去皮豆粕，發(fā)酵可能去掉一部分纖維素和水分，使蛋白會(huì)提高；
2.豆粕的可溶蛋白低，粉碎粒度如何，一般發(fā)酵豆粕產(chǎn)品要微粉或粉碎比較細(xì)的；
3. 可能三個(gè)廠子使用了相同的生產(chǎn)工藝，一個(gè)師傅培養(yǎng)出來的，顏色的不同是表象。

yinghuier

原帖由 月亮花 于 2007-10-4 13:02 發(fā)表

1 粗蛋白在46%左右不一定就是去皮豆粕，發(fā)酵可能去掉一部分纖維素和水分，使蛋白會(huì)提高；
2.豆粕的可溶蛋白低，粉碎粒度如何，一般發(fā)酵豆粕產(chǎn)品要微粉或粉碎比較細(xì)的；
3. 可能三個(gè)廠子使用了相同的生產(chǎn)工藝，一 ...

有道理，無論是否是去皮，應(yīng)該都是用豆粕生產(chǎn)的。
三種樣品的粉碎細(xì)度都很不好，應(yīng)該98%以上過100目。
使用完全相同工藝的可能性不是很大。現(xiàn)在主要的問題是搞不清楚為什么實(shí)驗(yàn)測(cè)的的可溶性蛋白含量如此相近。

山中的漫游者

呵呵，你再做另外一個(gè)試驗(yàn)，把你的標(biāo)準(zhǔn)豆粕樣品，用水泡濕，放在高壓鍋里面，蒸煮30分鐘，樣品干燥后，再用你的辦法測(cè)量一下小肽的含量結(jié)果如何？

yinghuier

原帖由 山中的漫游者 于 2007-10-4 19:15 發(fā)表
呵呵，你再做另外一個(gè)試驗(yàn)，把你的標(biāo)準(zhǔn)豆粕樣品，用水泡濕，放在高壓鍋里面，蒸煮30分鐘，樣品干燥后，再用你的辦法測(cè)量一下小肽的含量結(jié)果如何？

請(qǐng)問博士，高溫高壓蒸煮的目的是什么？
是不是我提這樣的問題，揭開了某些人的秘密，觸及了某些人的利益？博士不方便說？
還有用水泡濕需要泡多長時(shí)間，泡到什么程度？謝謝！:jiu:

yuebao101

是不是就是發(fā)酵豆粕？

憨豬

發(fā)酵方面，還是葉孤城有發(fā)言權(quán)!

山中的漫游者

原帖由 yinghuier 于 2007-10-5 08:09 發(fā)表


請(qǐng)問博士，高溫高壓蒸煮的目的是什么？
是不是我提這樣的問題，揭開了某些人的秘密，觸及了某些人的利益？博士不方便說？
還有用水泡濕需要泡多長時(shí)間，泡到什么程度？謝謝！:jiu:

這與任何人的利益無關(guān)，因?yàn)槲抑皇且粋€(gè)猜測(cè)，所以建議你試驗(yàn)一下，再告訴你。
我的猜猜是這樣的：
豆粕有20%多的水溶性小肽（用你的方法），發(fā)酵豆粕，不論什么工藝，在接種細(xì)菌以前都需要滅菌，也就是高壓蒸煮，而這個(gè)高壓蒸煮，本身是可以提高豆粕的消化利用率的，或者說，在蒸煮的時(shí)候，發(fā)生了很多水解反應(yīng)，如果你測(cè)出來，蒸煮之后達(dá)到了31%多，就表明，三家的發(fā)酵都是無效的